?　　測定黃體酮含量主要用高效液相色譜法，高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析。

　　方法原理：供試品和內標均制成甲醇溶液，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長254nm處檢測黃體酮(C21H30O2)和內標己烯雌酚的吸收值，計算出其含量。

　　(2) 色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數按黃體酮峰計算應不低于1000，黃體酮峰與內標物質峰的分離度應符合要求。

　　(1) 流動相：甲醇+水= 65 35

　　1. 稱取供試品：取本品25mg，精密稱定，置25mL量瓶中。

　　2. 對照品溶液的制備：精密稱取黃體酮對照品適量，加甲醇溶解并稀釋成溶液。

　　3. 內標溶液的制備：取己烯雌酚25mg，置25mL量瓶中，加稀甲醇溶解并稀釋至刻度，即得。

　　4. 供試品溶液的制備：上述供試品加稀甲醇溶解稀釋至刻度，即得供試品溶液。

　　注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

　　分別精密吸取上述供試品溶液與內標溶液5mL，置25mL量瓶中，用稀甲醇稀釋至刻度，混合均勻，取5μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長254nm處測定黃體酮和內標己烯雌酚的吸收值，按內標法以峰面積計算，即得。